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送样建议

声明:
尊龙凯时拒绝接收《人间传染的病原微生物名录》(点击查看)中危害程度为第一、第二类的高致病组织、血液、细菌等样品,只接收提取得到的核酸样品。 危害程度为第三、第四类的致病性或传染性的组织、血液、细菌等样品,必须事先通过销售、客服或运营经理与尊龙凯时技术人员联系,确定无高致病性和传染性后才能寄送样品,此时需注意:
1.样品寄送时应采用WHO提出的三级包装系统,第一层容器:装样品,要求防渗漏;第二层容器:要求耐受性好、防渗漏,容纳并保护第一层容器;第三层容器:运输用,最外层包装。
2.在第二层包装注明“致病性样品,接收时请注意”字样,并在样品信息单上注明其危害程度及接收注意事项。 此类样品寄送时请第一时间联系销售或运营经理,并务必邮件通知样品组,告知样品组相关寄送信息(快递单号、样品类型、样品数量)以及接收时的防护措施和注意事项。
3.提取风险提示和注意事项:核酸提取质量与物种及组织部位、采集方法及保存状态、提取方法及操作、实验器材及环境等因素均有密不可分的联系,尤其是三代超长提取对样本的要求更高。组织提取时可能受到上下游处理操作的影响,因此较难保证单次提取满足质量要求,客户应在寄送组织样品前进行备份。为了保障获得高质量的核酸,请务必按照送样手册所规定的准备样本。对珍贵样本或者微量样本,建议自行提取。取样过程中,需要全程佩戴手套,并且使用预冷乙醇对取样器材进行擦拭消毒,以免样本污染。

1.宏转录组

  • 1.1 组织样本

    a. 肠道内容物/粪便样本≥1g ? 液氮速冻,-80℃保存,干冰运输
    ? 不建议TRIzol保存,不建议RNAlater保存
    ? 不建议送粪便上清液
    b. 菌体>5*106个/> 0.5g ? 如为液体培养基,需13000xg,10min离心后去除上清,液氮速冻15min
    ? 如为贴壁菌,可PBS将菌体冲下来,放入离心管,13000xg,10min离心后去除上清,液氮速冻15min
    c. 滤膜≥5张 ? 过滤后,分离滤膜,去除滤膜周边白色,一张一张塞进50ml离心管,液氮速15min,-80℃保存,干冰送样;如果老师有设备条件,可以用高速离心代替滤膜过滤,具体方法:4℃ 13000rpm 10min,弃上清,液氮速冻,-80℃保存,干冰运输
    ? 直接冻滤器送样的话,冻存不彻底。不建议加保护液:不建议放RNAlater处理,因为滤膜富集的多为细菌和真菌,用RNAlater之后不好分离;不建议用TRIzol处理,因为细菌未经破壁直接用TRIzol提取是无法完全裂解的,会影响后续的提取效率
    ? 提取的时候改冲洗滤膜为研磨滤膜,得率会有所提高
    d. 污泥≥1g ? 放入冻存管,离心去上清后液氮速冻15min,-80℃保存,干冰运输 e. 新鲜植物组织干重≥ 0.8g ? 放入冻存管,离心去上清后液氮速冻15min,-80℃保存,干冰运输
    ? 成熟部位,例如植物茎、根、种子等部位建议2倍以上送样;如组织表面有异物请处理干净后送样
    f. 新鲜动物组织干重≥0.5g ? 放入冻存管,离心去上清后液氮速冻15min,-80℃保存,干冰运输
    ? 核酸不丰富部位,例如脂肪、成熟皮肤、骨头等部位建议酌情增加送样量
    g. 新鲜培养细胞≥1*107 注意上标问题 ? 放入冻存管,离心去上清后液氮速冻15min,-80℃保存,干冰运输
    ? TRIzol裂解10min,液氮速冻,-80℃保存,干冰运输
  • 1.2 核酸样本

    ? 体积:20ul≤V≤50ul;总量:≥500ng
    ? 使用无RNA酶水溶解(EB或者其他溶剂可能对建库过程中的酶反应有影响)
    ? 不可用TRIzol溶解送样,否则需要再提取一次
    ? 提取完成后,提供Nanodrop、AGE或Agilent 2100中一种或多种形式的分析结果以判断RNA的完整性、浓度、总量是否满足建库需求。检测后的 RNA 置于-80°C冰箱保存,用大体积干冰运输,并保证样本到达签收地开箱时有干冰剩余

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